TeSR™-E7™ Medium for Reprogramming (2-Component)/TeSR™-E7™重编程培养基(2组分)

admin 2024-10-15 36

TeSR™-E7™ Medium for Reprogramming (2-Component)/TeSR™-E7™重编程培养基(2组分)

货号:05914

规格:500 mL

价格:3310

产品类型:多能干细胞培养

品牌:STEMCELL Technologies

TeSR™-E7™是无异种成份且成份确定的重编程培养基,优化用于在无饲养层的条件下生成人iPS细胞。该培养基基于James Thomson博士领导实验室(威斯康辛大学麦迪逊分校)发表的E7配方。

优点:

- 易于识别和挑选集落。预筛选的成分可确保生成的iPS细胞具有高质量的集落形态,提高手动挑选的效率;- 快速亚克隆。减少分化和成纤维细胞的生长,确保迅速建立起同源iPS细胞的培养;- 效率的可重复性。无需饲养层、成分确定的配方,确保可重复且高效地生成人iPS细胞。

数据:

图1.TeSR™-E7™重编程时间轴示意图TeSR™-E7™可用于重编程中的整个诱导阶段(第3至25+天)。细胞经重编程后,可将iPS细胞集落挑选出来并接种于无饲养层的维持体系中进行扩增(如在Corning®Matrigel®或Vitronectin XF™基质上使用TeSR™)。*TeSR™=TeSR™系列培养基(mTeSR™1、TeSR™2、TeSR™-E8™)。

图2.TeSR™-E7™诱导期典型的iPS细胞克隆形态(A-B)诱导的1-2周后,将出现上皮样的小簇克隆(箭头指向)。(C-D)通过2-3周,这些小簇长成前iPS样细胞。(E-F)三到四周后将观察到更大的ES细胞样克隆。从上图展示的是用含OCT-4, SOX2, KLF-4和 L-MYC4个基因的 episomal载体对人成纤维细胞进行重编程获得的代表性克隆。

图3. 在TESR™-E7™中培养的高质量IPS细胞集落形态(A)TeSR™-E7™相比于(B)基于KOSR的iPS细胞诱导培养基,可生成更易识别的iPS细胞集落,即:具有清晰确定的边缘,以及在背景中较少的成纤维细胞的增长。图中所示为成人成纤维细胞在使用含有OCT-4、SOX2、KLF-4和L-MYC的非整合型附着体载体进行重编程后的典型集落。

图4. 分别在含有合格的bFGF与不合格的bFGF的TeSR™-E7™中培养所生成的原代iPS细胞集落的比较

(A) 在TeSR™-E7™生成的iPS细胞集落具有清晰确定的边界,易于识别。(B) 不合格的成分会导致生成的集落边界不确定,并出现更高度的分化。图中所示为成人成纤维细胞在使用含有OCT4、SOX2、KLF-4和c-MYC的非整合型附着体载体进行重编程后的典型集落。

图5.mTeSR™或 TeSR™-E8™中培养的iPS克隆(A - D)在TeSR™-E7™ 中重编程获得的iPS细胞克隆在(A-B) mTeSR™1+ Corning® Matrigel® 或者(C, D)TeSR™-E8™+ Vitronectin XF™ 上培养后,表现出典型的ES细胞形态,即中心紧致、边缘清晰、核仁明显以及高核质比。(E)在 mTeSR™1 或 TeSR™-E8™传代2代后,iPS细胞表达高水平的多能性标记 物,以OCT-4和SSEA-3为代表进行了流式分析。 数据显示:mean ± SEM, n = 4

图6. TeSR™-E7™支持成人皮肤成纤维细胞以及新生成纤维细胞的重编程用episomal重编程载体进行(A)成人皮肤成纤维细胞(NHDF, 33岁的女性)和(B)新生成纤维细胞(BJ cells)的重编程。与基于KOSR编程iPS相比, TeSR™-E7™在(NHDF性)和(BJ cells)上显示了同样的重编程效率。TeSR™-E7™比TeSR™-E8™重编程效率高。数据显示mean ± SEM, n ≥ 6, * p ≤ 0.05。

图7. TeSR™-E7™重编程的iPS细胞拥有正常的核型TeSR™-E7™重编程的iPS细胞,通过mTeSR™1或者TeSR™-E8™培养基培养5代后进行G-显带核型分析。三个iPS细胞系均保持了正常的核型。上图为具有代表性的核型分析图。

图8. iPS细胞的三胚层分化TeSR™-E7™重编程来的iPS细胞可分化成三胚层。用STEMdiff™内胚层分化试剂盒获得内胚层,显示有93.6% 的SOX17 + CXCR4 + 细胞。STEMdiff™ APEL™进行中胚层分化,显示9% 的CD31 + 细胞(数据未显示)和 84.8% 的VEGFR2 + CD105 + 细胞。用STEMdiff™神经诱导培养基代表外胚层分化,免疫组化显示高水平的PAX6 而不表达OCT-4。

组成成分:

▪TeSR™-E7™基础培养基, 480 mL(货号#05919)▪TeSR™-E7™ 25X 添加物, 20 mL(货号#05915)

相关产品:

▪TeSR™-E8™ (货号 #05990)▪mTeSR™1 (货号 #05850)▪温和细胞解离试剂(货号 #07174)▪Y27632 ROCK Inhibitor (货号 #72302)▪STEMdiff 定型内胚层分化试剂盒(货号#05110)▪STEMdiff APEL2 培养基(货号#05270)▪STEMdiff神经诱导培养基, 250mL(货号#05835)

技术参数

产品优点 1. 易于识别和挑选集落。预筛选的成分可确保生成的iPS细胞具有高质量的集落形态, 提高手动挑选的效率; 2. 快速亚克隆。减少分化和成纤维细胞的生长,确保迅速建立起同源iPS细胞的培养; 3. 效率的可重复性。无需饲养层、成分确定的配方,确保可重复且高效地生成人iPS细胞。

产品类型 细胞培养

细胞类型 ES细胞和iPS细胞

产品线 mTeSR™1和TeSR™2, TeSR™- E8™

适用物种 人

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