Click-iT™ Plus EdU Alexa Fluor™ 594 Imaging Kit
货号:C10639
规格:1 kit
价格:8276
产品类型:细胞增殖活性检测
品牌:Thermo Fisher
物种:恒河猴/小鼠/大鼠
宿主:小鼠
抗体亚型:IgG
荧光染料:其它
Click-iT Plus EdU 细胞增殖成像试剂盒已优化并应用于荧光显微镜,且这是一种优于传统增殖检测的方法。本测定试剂盒中经修饰的胸腺嘧啶核苷类似物 EdU(5-乙炔基-2'-脱氧尿苷,一种胸腺嘧啶核苷的核苷类似物)能有效的掺入新合成的 DNA 并且通过明亮的、非感光的 Alexa Fluor™ 染料以快速、高特异性、温和的点击反应进行荧光素标记。• 简单 — 与传统方法相比,第一次试验及每次试验花费的时间更少• 高效 — 无需变性步骤或严格的处理• 结果内容丰富 — 改善了细胞形态、抗原结构、GFP 荧光信号和 DNA 完整性的保存• 一致性 — 检测不依赖不同抗体批次该试剂盒包含标记和检测掺入的 EdU 及对贴壁细胞样品进行细胞周期分析所需的所有成分。用于细胞周期分析时,试剂盒包含蓝色荧光 Hoechst 33342 染料。本款试剂盒包含的试剂足够供每次检测使用 500 µL 的反应缓冲液标记50个 18x18 盖玻片。避免与 BrdU 方法相关的严格处理测量细胞增殖变化是评估细胞健康、确定基因毒性和评估抗癌药物的基本方法。较准确的方法是直接检测 DNA 的合成。传统的方法利用核苷类似物 BrdU(5-溴-2'-脱氧尿苷,一种胸腺嘧啶核苷的核苷类似物)掺入新转录的 DNA。样品掺入后用严格的方法处理(HCl、加热或酶)使 DNA 变性并将 BrdU 分子暴露于抗 BrdU 抗体进行检测。然而,使用 BrdU 方法检测细胞增殖较为耗时,且难以一致地进行。这种方法所需的严格处理会对样品完整性、细胞形态、图像质量和多通路能力产生不利影响。Click-iT™ Plus EdU 检测是基于核苷类似物 EdU 掺入 DNA 以测定新 DNA 合成率。检测是通过催化的“点击”反应完成的,该反应通常在30分钟内完成。点击反应使用生物正交(生物特有)部分以荧光标记增殖的细胞,产生较低的背景和较高的检测灵敏度。由于温和的反应条件,Click-iT™ Plus 检测可精确的确定细胞增殖,同时保留细胞形态、DNA 完整性、抗原结合位点和 GFP 荧光信号。DNA 完整性的保留可使 DNA 着色,包括用于细胞周期分析的染色。 |
数据: |
图1.Click-iT® Plus EdU Alexa Fluor® 594 Imaging Kit vs. BrdUErk2-GFP expressing A375 melanoma cells were subjected to the HCl denaturation method required for BrdU detection. This treatment results in a loss of GFP signal, and the BrdU proliferation signal is moderately bright (80 msec exposure). The GFP signal is lost with the Click-iT® EdU Imaging Kit, but the Click-iT® Plus EdU Alexa Fluor® 594 (C10639) proliferation assay retains GFP signal, and the proliferation signal (EdU) is very bright (8 msec exposure). HCA analysis performed using ThermoFisher Cellomics ArrrayScan® VTI.图2.GFP and proliferation signal detected in HeLa cellsHeLa cells were transduced with CellLights® Golgi-GFP, BacMam 2.0 (C10592). After an overnight incubation, the proliferation signal from these cells was measured using the Click-iT® Plus EdU Alexa Fluor® 594 Imaging Kit (C10639).图3.Click-iT® Plus EdU Alexa Fluor® 594 proliferation assay in actionProliferation was detected in HeLa cells using Click-iT® EdU Alexa Fluor® 594 Imaging Kit and the Click-iT® Plus EdU Alexa Fluor® 594 Imaging Kit. The retention of the GFP signal can be seen in the image on the right. The Alexa Fluor® 594 EdU proliferation signal is clearly displayed as a pink fluorescence. |
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技术参数 产品优点 1. Simple—works the first time, every time, in less time than traditional methods;
2. Efficient—no denaturation steps or harsh treatment required;
3. Content-rich results—improved preservation of cell morphology, antigen structure, GFP fluorescent signal, and DNA integrity.
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