HepatiCult™ Organoid Growth Medium (Mouse)/HepatiCult™肝类器官生长培养基（小鼠）
货号：06030
规格：1 Kit
价格：3924
产品类型：类器官培养
品牌：STEMCELL Technologies
| HepatiCult™肝类器官生长培养基 (小鼠)是一款不含血清，成分明确的培养基，用于小鼠肝类器官的建立和维持培养。这些类器官，或者叫 "mini-livers"。该类器官为研究肝干/祖细胞提供体外类器官培养系统。HepatiCult™中培养的肝类器官具有表达肝干/祖细胞(PROM1、Axin2、SOX9和CD44)、导管(K RT19和HNF1B)和肝细胞(HNF4A、AFP)等上皮基因的标记。 肝类器官可每4-7天传代一次，可以冷冻保存，并启动下游分化。HepatiCult™支持小鼠肝脏类器官培养，无论是Matrigel dome方式还是稀释基质悬浮液培养方式。类器官的培养使得在生理相关系统中对肝上皮进行体外表征更方便，减少了对动物的需求。 |
优点： |
| - 方便。一周内即可在体外生成类器官。- 清晰的标准操作流程。无需使用肝损伤小鼠模型，无需手工挑选肝管或进行细胞分选。- 简单，双组分。不含血清，培养基成分确定。- 灵活。起始样本可来源于肝管小段或单个细胞，培养方法可使用胞外基质凝固液滴（matrix dome）或悬浮培养 |
数据： |
| 图1. 小鼠肝祖细胞类器官可来源于各种起始样本无论是从（A）肝管小段（B）单个细胞或（C）冷冻保存的类器官，都可在HepatiCult™类器官生长培养基（小鼠）中生成肝祖细胞类器官。所有的类器官在 Matrigel®dome中生长，并在原代培养的第7天或解冻后的第1代（冷冻保存的类器官）成像。图2. 肝祖细胞类器官可使用Matrigel®dome或Matrigel®suspension的方法进行培养从新鲜分离的小鼠肝管组织来源，在HepatiCult™类器官生长培养基（小鼠）中培养的肝祖细胞类器官，可使用（A）Matrigel® dome或（B）Matrigel®suspension的方法。两种培养条件下生长的类器官可在4 - 7天内传代。图3. 在HepatiCult™类器官生长培养基（小鼠）中生长的类器官显示出一些典型的成熟肝上皮特征（A）肝祖细胞类器官呈现肝上皮典型的多边形形态。（B）肝祖细胞类器官显示出双核（箭头），此为成熟肝细胞的共同特征。（C）免疫细胞化学分析显示MRP4（绿色）的分布为沿着类器官外部；MRP4是一种膜结合、单向性外排转运蛋白。DAPI（红色）的分布位于细胞核。这表示类器官的细胞出现极化，因上皮基底外侧表面远离管腔的。（D）Ki67（红色）染色呈阳性结果，显示肝类器官含有活跃增殖的祖细胞群。细胞核用DAPI（蓝色）进行染色。图4. 类器官基因表达水平分析通过RNA-seq分析标志物得表达，在HepatiCult™类器官生长培养基（小鼠）中培养的类器官，无论是使用Matrigel® dome或稀释的Matrigel® suspension的方法，都表达与肝脏干/祖细胞相关的标志物。类器官还表达出低水平的与成熟肝细胞相关的标志物，包括胆管细胞和肝细胞。纵列代表第1 - 40代培养物的生物学重复结果。图5. 在HepatiCult™类器官生长培养基（小鼠）中类器官的扩增使用HepatiCult™类器官生长培养基（小鼠）培养的类器官可以在多次传代后依旧显示高效生长。培养物在每次传代时的平均传代比例（split ratio）为1:25。图6. 肝祖细胞器官的分化生长在 HepatiCult™类器官生长培养基（小鼠）（EM）中的肝祖细胞类器官可转换至分化培养基（DM）中分化成更类似于成熟细胞的类型。转换到分化的培养基后1, 2，肝类器官显示成熟肝脏标志物，包括（A）Hnf4a和（B）Alb的上调，而肝干/祖细胞标志物如（C）Sox9和（D）Axin2则下调。导管标志物如（E）Krt19和（F）Hnf1β亦上调。每个标志物的相对量化（RQ）标准为18S和TBP管家基因。参照标准为在HepatiCult™类器官生长培养基（小鼠）中使用Matrigel® dome方法培养的肝祖细胞类器官。 |
组成成分： |
| • HepatiCult™ 小鼠类器官基础培养基, 95 mL• HepatiCult™ 小鼠类器官添加物, 5 mL |
相关产品： |
| ▪PancreaCult™类器官生长培养基（小鼠）(货号#06040）▪IntestiCult™小鼠肠类器官生长培养基（货号#06005）▪GCDR解离试剂（货号#07174）▪Corning Matrigel（货号#356231）▪mTeSR1(货号#85850） |
技术参数 产品优点 1.方便。一周内即可在体外生成类器官。
2.清晰的标准操作流程。无需使用肝损伤小鼠模型，无需手工挑选肝管或进行细胞分选。
3.简单，双组分。不含血清，培养基成分确定。
4.灵活。起始样本可来源于肝管小段或单个细胞，培养方法可使用胞外基质凝固液滴（matrix dome）或悬浮培养。
产品应用 细胞培养; 扩增; 维持培养; 类器官培养
产品类型 类器官培养基
细胞类型 肝实质细胞
产品线 HepatiCult
适用物种 小鼠
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