MethoCult™ H4034 Optimum (MethoCult™ GF H4034) is a methylcellulose-based medium for the growth and enumeration of hematopoietic progenitor cells in colony-forming unit (CFU) assays of human bone marrow, mobilized peripheral blood, peripheral blood, and cord blood samples. MethoCult™ H4034 Optimum has been formulated to support optimal growth of erythroid progenitor cells (BFU-E and CFU-E), granulocyte-macrophage progenitor cells (CFU-GM, CFU-G and CFU-M), and multipotential granulocyte, erythroid, macrophage, megakaryocyte progenitor cells (CFU-GEMM). The inclusion of G-CSF in Optimum formulations improves discrimination of myeloid colony subtypes. This formulation is compatible with STEMvision™ software for automated colony counting. |
图1. 使用MethoCult™ Express经过7天培养,或使用 MethoCult™ Optimum经过14天培养后,对人脐带血祖细胞生成集落的典型STEMvision™ 扫描图像。 使用STEMvision™人脐带血( A) 7天分析软件包(产品号 #22001)和(B)14天分析软件包(产品号 #22005)对图像进行分析。绿圈所示为仅对CFUs进行计数的7天CB CFU检测后的每个单个集落(A)。红圈所示为 14天 CB CFU检测中的红系细胞集落(由 CFU-G、CFU-M或CFU-GM生成),蓝圈所示为为14天 CB CFU检测中的混合集 落(由 CFU-GEMM生成)( B)。含血红细胞的红系和混合集落显示为红色。 图2. 在第7、10和12天,使用STEMvision™对集落(髓系和红系)总数进行自动化计数,其结果与对小鼠骨髓细胞的手动计数结果有很强的相 关性。 将骨髓细胞接种于MethoCult™ M3434中。在( A)第 7天、( B)第10天和(C)第12天,分别用倒置显微镜进行手动计数,和用STEMvision™小鼠总CFU分析软件包 (产品号 #22008)进行自动计数。我们建议在第10和第12天之间对接种于M3434中的小鼠祖细胞进行计数CFU检测。灰虚线代表两者间的理论最佳线性相关性,红实 线则代表两者间的实际线性相关性。各数据集(A: n = 104 CFU检测,B: n = 38,C: n = 99)的相关系数(R ontrol)。 |