ImmunoCult™ Dendritic Cell Culture Kit/树突状细胞(DC)培养试剂盒

admin 2024-10-15 22

ImmunoCult™ Dendritic Cell Culture Kit/树突状细胞(DC)培养试剂盒

货号:10985

规格:1 kit

价格:7974

产品类型:细胞培养

品牌:STEMCELL Technologies

The ImmunoCult™ Dendritic Cell Culture Kit (DC细胞培养试剂盒)是被优化用于在体外将单核细胞向DC细胞分化和成熟的一款试剂盒,包括培养基和添加物。使用这款培养基,7天内即可得到DC细胞,而且无需太多的操作时间。搭配EasySep™或RosetteSep™单核细胞分选试剂盒进行使用,这款完试剂盒可以帮助客户从血液或细胞单采样本中简便且可重复性地获得DC细胞,不需要考虑细胞分离后为DC的分化和成熟配制培养基及添加营养组分。并且,培养基及细胞分化的添加物全部是无动物源成分,每种组分都可以单独售卖。

优点:

- 成分确定:培养基及分化添加物都无血清,无动物源成分; - 使用方便:即拆即用,配方已被优化可支持DC的分化和成熟;- 效果可靠:获得高产量的、成熟的,具备特定表型和功能的DC;- 使用灵活:培养基或添加物都可以加入客户的现有培养体系也可结合使用。

数据:

图1.流程图培养EasySep免疫磁珠分离的单核细胞1 x 106cells/mL,在添加了ImmunoCult™DC细胞分化添加物(货号#10988)的ImmunoCult™-ACF DC培养基(货号#10987)中进行分化,形成成熟的DC细胞。第3天,更换培养基,并继续孵育2天。第5天,不更换培养基,再原来的培养基中加入ImmunoCult™DC成熟添加物(货号#10989)。第7天,收获完全成熟的树突状细胞供下游应用。

图2.用含添加物的Immuocult™-ACF树突状细胞培养基产生的成熟DC具有期望的表型如图1所述,将EasySep™分离的单核细胞培养并分化为成熟的DC。(A)通过流式细胞术测定第7天(成熟DC)的细胞中CD14和CD83表达的百分比。第7天,93±5%的细胞表达成熟DC标记CD83,仅1±1%的细胞仍表达单核细胞标记CD14(平均值±SD,n=39)。通过计数第7天的活细胞总量与第1天活得单核细胞总量的相对值确定成熟DC的产量。第7天,存活的成熟DC的产量一致为45±25%(平均值±SD,n=39)。(B)如图1所述培养未成熟DC。在第5天,细胞在含成熟添加物的培养基中培养2天(成熟DC)或不含成熟添加物物(未成熟DC)。在第7天收集上清液,通过ELISA测定IL-12p70水平。成熟和未成熟DC上清液中IL-12p70的浓度分别为361±81和5±2pg/mL(平均值±SEM,n=27)。

图3.用ImmunoCult™-ACF DC细胞培养基和添加物产生的成熟DC细胞诱导T细胞增殖用ImmunoCult™-ACF DC细胞培养基和添加物或其他无血清竞品培养基(竞品1和2)及相应的添加物(竞品2),产生的成熟DC,与1 x 105CFSE标记的(A)同源CD3 T细胞(MLR法)或(B)同源CD8 T细胞(抗原特异性T细胞反应)一起在ImmunoCult™-XF T细胞扩增培养基中培养。(A) DC:T细胞比例为1:25,(B)在T细胞培养前,将人巨细胞病毒(Cytomegalovirus)、EB病毒(Epstein-Barr)和流感病毒(CEF)的HLA-Ⅰ类多肽负载于不成熟的DC中,用成熟添加物刺激2天。按DC:T细胞比例1:4或1:10培养。(A,B)CFSE标记的T细胞单独在培养基中培养(阴性对照)或用ImmunoCult™ Human CD3/CD28 T细胞激活剂激活(阳性对照)。培养5-7天后,用流式细胞仪(平均±SEM)(A)n=5(B)n=4(竞品1和2,n=3)检测分化T细胞数(CD3+CFSElo)。ImmunoCult™-ACFDC培养基中诱导的成熟DC细胞与在任何竞品培养基中产生的DC类似,诱导同源的和抗原特异性T细胞的增殖。竞品1和2,不按特定顺序,包括CellGro DC培养基(CellGenix)和Promocell DC形成培养基DXF。

组成成分:

▪DC细胞无动物源成份基础培养基, 100 mL (货号 #10987)▪DC细胞无动物源成份分化添加物(货号 #10988)▪DC细胞成熟添加物(货号 #10989)

相关产品:

▪EasySep 人单核细胞分选试剂盒(货号#19359)▪ImmunoCult 人CD3/CD28T细胞激活剂, 2mL(货号#10971)

▪ImmunoCult人CD3/CD28 /CD2T细胞激活剂, 2mL(货号#10970)
技术参数

产品优点 1. 成分确定:培养基及分化添加物都无血清,无动物源成分; 2. 使用方便:即拆即用,配方已被优化可支持DC的分化和成熟; 3. 效果可靠:获得高产量的、成熟的,具备特定表型和功能的DC。

产品应用 细胞培养; 分化

产品类型 专业培养基; 添加物

推荐用于 优化用于在体外将单核细胞向DC细胞分化和成熟的一款试剂盒。

细胞类型 树突状细胞; 单核细胞

产品线 ImmunoCult

适用物种 人

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