STEMdiff™ Hematopoietic Kit/STEMdiff™ hPSC向造血细胞分化试剂盒

admin 2024-10-15 25

STEMdiff™ Hematopoietic Kit/STEMdiff™ hPSC向造血细胞分化试剂盒

货号:05310

规格:1kit

价格:8132

产品类型:多能干细胞培养

品牌:STEMCELL Technologies

STEMdiff™ 造血祖细胞分化试剂盒包含成份明确、不含血清的基础培养基和添加物用于在无滋养层条件下,人ES和iPS分化为表达CD34和CD45的造血祖细胞。此试剂盒被优化用于标准的单层细胞分化体系,用时12天。在前3天,细胞被诱导向中胚层分化,随后的9天,细胞进一步分化为造血祖细胞。整个12天流程结束后,可以很容易地从培养上清液中收集到造血祖细胞。一般产率在25-65%(平均43%)。生成的CD34+CD45+祖细胞有形成CFU集落的能力。STEMdiff™ 造血祖细胞分化试剂盒优化用于mTeSR™1 或TeSR™-E8™中培养的ES和iPS细胞。

优点:

- 成份明确. 无血清,无滋养层的配方;- 使用方便.简单的单层培养体系可生成悬浮的造血干细胞,方便收获细胞;- 快速. 不到两周即可生成造血干细胞;- 高产量. 一个试剂盒可以生成4-18*10e6 CD34+CD45+的造血干细胞;- 使用灵活.可从多种人ES和iPS细胞系开始分化生成造血干细胞。

数据:

图1. 造血细胞分化流程分化前一天,收集 mTeSR™1 或 TeSR™-E8™中培养的hPSC克隆,以聚集体(100-200um)形式接种,密度为10-20个聚集体/cm2。培养1天后,用Medium A (STEMdiff™ Hematopoietic Basal Medium containing Supplement A)代替TeSR,开始诱导细胞向中胚层样分化(day 0)。第2天,用新鲜的Medium A进行半换液。第3天,培养基换成Medium B (STEMdiff™ Hematopoietic Basal Medium containing Supplement B)并分别在第5天、7天和10天进行半换液,进一步分化成造血细胞。典型的,到了第12天就可以从培养上清液中收集大量的HPCs。

图2. hPSC来源的HPCs的形态使用stemdiff™造血细胞试剂盒在分化第12天的代表性图片(A)hES(H1)细胞和(B)hiPS(wls-1c)。分化的细胞表现出典型的HPC形态:圆形,悬液中自由浮动。

图3.CD34+CD45+/CD43+HPCs的高效、稳定形成在12孔板的一孔中,用stemdiff™造血分化试剂盒培养hES和hiPSC细胞12天。培养结束后,收集上清液中的细胞并用流式细胞仪分析造血细胞表面标志物CD34、CD45、CD43的表达。(A,B)是培养的hES细胞(H1、H9)和hiPS细胞(stips-m001)的造血干细胞表面标记的流式图。(C,D)培养的hES细胞(H1、H9)和hiPS细胞(WLS-1C, STiPS-F016, STiPS-M001 and STiPS-B004)中CD34、CD45细胞数的百分比。数据显示为平均数±SEM;n≥3。

图4.hPSC来源的HPCs产生多谱系克隆造血分化第12天时,收集细胞培养物悬液中的细胞,用甲基纤维半固体培养基(货号#04435)进行CFU集落鉴定。(A)6个不同的细胞系形成的CFU频率。不同细胞系之间的CFU频率不同,平均大约120个CFU /10000个hPSC来源的HPCs。(B)观察到的不同祖细胞类型包括粒细胞/巨噬细胞(CFU-GM、CFU-G、CFU-GM),红细胞(BFU-E和CFU-E)和混合(CFU-GEMM)集落。集落在40倍镜下观察。

相关产品:

▪mTeSR™1人PSC维持培养基(货号#05850/85850)▪TeSR™-E8™人PSC维持培养基(货号#05940/05990)▪MethoCult™ H4435 Enriched(货号#04435)
技术参数

产品优点 1. 成份明确. 无血清,无滋养层的配方; 2. 快速. 不到两周即可生成造血干细胞; 3. 高产量. 一个试剂盒可以生成4-18*10^6 CD34+CD45+的造血干细胞。

产品应用 细胞培养; 分化

产品类型 专业培养基

推荐用于 用于将人多能干细胞向造血干/祖细胞进行分化。

细胞类型 造血干细胞和祖细胞; 多能干细胞

产品线 STEMdiff

适用物种 人

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