Annexins 是一系列钙离子依赖型磷脂结合蛋白，可优先结合磷脂酰丝氨酸 (PS)。在正常生理条件下，PS 主要位于细胞质膜的内层上。细胞凋亡开始后，PS 透过磷脂双分子层使其不对称分布逐渐消失，并转移至细胞膜的外层上，将细胞标记为吞噬目标。在细胞膜外表面时，可通过荧光标记的 Annexin V 在钙离子依赖模式下检测 PS。 在细胞凋亡早期，质膜可阻挡碘化丙啶 (PI)、7-AAD 等活性染料或者 eFluor™ 660 或 eFluor™ 780 等 Fixable Viability Dye 进入细胞。这些细胞将被 Annexin V 染色，但不被活性染料染色，这样可以区分处于细胞凋亡早期的细胞。然而，在凋亡晚期，细胞膜丧失完整性，因此 Annexin V 也可接触细胞内的 PS。活性染料可用于从早期凋亡细胞（Annexin V 阳性，活性染料阴性）中分辨出这些晚期凋亡和坏死细胞（Annexin V、活性染料阳性）。 注意：不建议将 Fixable Viability Dye eFluor™ 450 与 Annexin V Apoptosis Detection Kit 联用。