STEMdiff™ Intestinal Organoid Kit/STEMdiff™肠类器官分化培养试剂盒

admin 2024-10-17 15

STEMdiff™ Intestinal Organoid Kit/STEMdiff™肠类器官分化培养试剂盒

货号:05140

规格:1 kit

价格:12862

产品类型:类器官培养

品牌:STEMCELL Technologies

STEMdiff™肠类器官分化试剂盒是一种无血清细胞培养基系统,通过一个简单的三阶段分化方案,可以高效、快速地生成人多能干细胞(hPSC)来源的肠道器官。使用该试剂盒,将hPSC诱导成内胚层、中/后肠球体和可以用来进行长期培养或冻存的的肠类器官。这些肠器官具有细胞组成和组织结构,可以模拟肠上皮和相关间质的发育,使它们成为一个与肠发育直接相关的方便的模型系统。STEMdiff™肠类器官试剂盒是以Spence等人发表的配方为基础的(Nature,2011年),并经过优化,从而提高了hPSC向类器官分化的效率和重复性。人体肠道器官可以作为研究肠道发育和细胞生物学、肠道炎症、肠再生、微生物相互作用、疾病建模、药物发现和复合筛选的模型系统。该试剂盒适用于mTeSR™1中的细胞分化。为了延长培养和传代,可单独购买STEMdiff™肠类细胞器生长培养基(货号#05145)。

优点:

-生理相关性。小肠类器官可模拟发育中的肠道上皮和相关的间充质系统。- 高效。支持从人ESC和iPSC细胞系高效分化为肠类器官。- 方便。肠类器官可以通过传代以维持长期培养或将其进行.- 冷冻保存,提高了实验的灵活性。- 无血清。优化的配方提高了实验的一致性。

数据:

图1. STEMdiff™肠类器官试剂盒支持从hPSCs分化为人肠类器官从hPSC分化为肠类器官需要经过三个阶段。在培养的第3天,培养物表现出典型的定型内胚层分化特性并开始进行中/后肠的分化。在中/后场分化期间(第5-7天),细胞形成中/后肠球体,从细胞单层释放至培养基中。将这些球体收集,用胞外基质包裹,并在STEMdiff™肠类器官生长培养基中进一步培养成熟为肠类器官。

图2. STEMdiff™肠类器官试剂盒支持从多个ESC和iPSC细胞系有效构建和扩增肠类器官STEMdiff™肠类器官试剂盒支持从ESCs(H9,H7)和iPSCs(WLS-1C, STiPS-MOO1)高效构建和扩增肠类器官。(A)从不同细胞系来源的类器官都显示有效地向定型内胚层分化的能力,分化的第3天时共表达FOXA2和SOX17。(B)源于ESC和iPSC的培养物都表现出中/后肠诱导的有效球体的形成。图中所示为每孔得到的球体总数。(C)从ESCs或PSCs来源的类器官都可以被长期传代。图中所示为每代的细胞得率。类器官每7-10天传代,传代比例在1:2到1:4。每个数据点均为3次重复实验的平均值。误差线代表平均值的标准差。

图3. 使用STEMdiff™肠类器官生长培养基培养的肠类器官的特征使用细胞免疫荧光染色对肠类器官进行标志物表达染色。(A、B)肠类器官表达肠祖细胞的标志物CDX2和肠隐窝标志物SOX9。这些类器官由极化的上皮细胞形成,EPCAM位于类器官的外侧(基底外侧)表面(A),且表达成熟细胞典型标志物,包括MUC2(A:杯状细胞)和CHGA(B:内分泌细胞)。(C、D)desmin(C)和vimentin(D)阳性表达表明类器官中包括间充质细胞,而KRT20(C)和Ki67(D)分别为已分化的肠道细胞和肠干细胞的标志物。图片为整个肠类器官(培养至P28第7天)的免疫荧光染色的横截面。

组成成分:

▪STEMdiff™内胚层分化基础培养基,100 mL▪STEMdiff™内胚层分化基础培养基,100 mL▪STEMdiff™定性内胚层分化添加物CJ, 1.1mL▪STEMdiff™肠胃分化添加物PK, 0.64 mL▪STEMdiff™肠胃分化添加物UB, 0.64 mL▪STEMdiff™肠类器官基础培养基, 100 mL▪STEMdiff™肠类器官分化添加物, 2 mL

相关产品:

▪IntestiCult™人肠类器官生长培养基(货号#06010)▪IntestiCult™小鼠肠类器官生长培养基(货号#06005)▪GCDR解离试剂(货号#07174)▪Corning Matrigel(货号#356231)▪mTeSR1(货号#85850)

技术参数

产品优点 1.生理相关性。小肠类器官可模拟发育中的肠道上皮和相关的间充质系统。 2.高效。支持从人ESC和iPSC细胞系高效分化为肠类器官。 3.方便。肠类器官可以通过传代以维持长期培养或将其进行.

产品应用 细胞培养; 分化; 类器官培养

产品类型 类器官培养基

细胞类型 PSC衍生内胚层; 肠细胞

产品线 STEMdiff

适用物种 人

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