Pierce HA-Tag IP/Co-IP Kit HA-Tag IP / Co-IP套件
货号：26180
规格：25 reactions
价格：6419
产品类型：免疫印迹/组化
品牌：Thermo Fisher
| Thermo Scientific Pierce HA 标签 IP/Co-IP 试剂盒提供使用 HA 标签诱饵蛋白进行免疫沉淀 (IP) 或免疫共沉淀 (Co-IP) 反应所需的亲和树脂、阳性对照品和其他试剂。该试剂盒以共价固定了高特异性抗 HA 抗体的交联微珠状琼脂糖为基础。即用型亲和树脂以及所含缓冲液、微量离心柱、阳性对照品和易于遵循的说明构成了足以进行 25 次 IP 或 Co-IP 测定的全套试剂。在培养出含有标记融合蛋白质的样本后，在琼脂糖微珠上捕捉到含有HA标记诱饵蛋白质的相互作用复合物。简单洗涤步骤后，在提供的洗脱缓冲液或 SDS-PAGE 上样缓冲液中易于从树脂中洗脱特异性蛋白相互作用复合物，以进行后续分析。源于人流感病毒 HA 蛋白的血凝素 (HA) 肽 (YPYDVPDYA) 是几种用于重组蛋白表达的融合蛋白标签之一。利用特异性、高亲和力固定化抗体，HA 标签融合蛋白可从细菌和哺乳动物细胞裂解物以及 Pierce 人体外翻译反应液中快速纯化。对于免疫共沉淀反应，简单的洗涤步骤可在提供的洗脱缓冲液或 SDS-PAGE 上样缓冲液中富集和洗脱特异性蛋白相互作用复合物，以便进行后续分析。 |
| 特点： |
| -经改良—更新后的试剂盒包括更加固定的抗体树脂和改良方案以及作为阳性对照品的 GST-PI3K-SH2-HA 融合蛋白-特异性—高特异性抗 HA 单克隆抗体可提供高得率的免疫沉淀产物及清洁的 Western 印迹检测-兼容—包括适用于多种洗脱条件的方案和试剂，以适应不同的蛋白灵敏度和下游应用-稳健—该试剂盒和抗 HA 琼脂糖与各种细胞裂解物和生理（非变性）缓冲系统兼容-简单、便利—全套试剂盒包括所有必要试剂、便利的离心柱和易于遵循的说明 |
| 数据： |
Immunoprecipitation of HA-tagged protein (GST-PI3K-SH2-HA) from E. coli lysateCoomassie Stained gel. Lane 1: MW marker, Lane 2: 15µL of 0.25mg/mL of positive control lysate, Lane 3: 15µL of Flow-through, Lane 4: 15µL of Glycine, pH 2.8 elution fraction. Co-immunoprecipitation of active E2F1:HA-tagged pRb complexHA-tagged pRb was expressed using a Pierce Human in vitro Expression System. 50µL of the translation reaction was diluted to 200µL in TBS and added to 15µL of agarose resin and incubated for 1 hour at 4°C as a non-specific pre-clearing step. The cleared translation reaction was added to 50µL of anti-HA resin and incubated for 3 hours at 4°C with end-over-end rocking. The resin was washed with 3 x 500µL of TBS-T. HA-pRb:E2F1 complex was eluted with the addition of 30µL of 2X non-reducing sample buffer. In vitro translation reactions without and with HA-pRb DNA (lanes 1 and 3, respectively) and anti-HA agarose elution fractions from each (lanes 2 and 4, respectively) were probed with rabbit anti-E2F1 (Part No. PA5-17549) and mouse anti-HA (Part No. 26183) and detected with Thermo Scientific SuperSignal West Dura Extended Duration Substrate (Part No. 34075). |
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