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PneumaCult™-ALI Medium/人支气管上皮细胞气液界面培养基

admin 2024-10-15 40

PneumaCult™-ALI Medium/人支气管上皮细胞气液界面培养基

货号：05001

规格：1 盒

价格：2818

产品类型：支气管上皮细胞培养

品牌：STEMCELL Technologies

pneumacult™-ALI培养基（货号# 05001）是成份明确，不含血清及牛脑垂体提取物（BPE）的培养基，用于在气液界面下培养人气道上皮细胞。培养在 PneumaCult™-ALI 中的气道上皮细胞经历纤毛分化从而形成类似于人体内形态和功能的假复层上皮。PneumaCult™-ALI培养基包括12mm的Transwell®（货号#05021）或者6.5 mm的Transwell®（货号#05022）。此外， PneumaCult™-ALI培养基在3D培养系统中支持分化不同的气道上皮细胞。对于详细的protocol，可联系010-57438396或者点击www.nwbiotec.com获取。PneumaCult™-ALI 培养基中添加PneumaCult™-Ex添加物（货号#05040），构成了一个完全无BPE的培养系统用于体外模拟人气道模型。该系统也适用于疾病模型，毒性研究和临床前药物开发包括吸入药物制剂。

优点：

- PneumaCult™-ALI培养HBECs经过纤毛分化形成酷似人类呼吸道的一个假复层上皮- PneumaCult™-ALI是无血清、无BPE的批次稳定的培养基- 毒理/病毒感染结果更能体现体内情况；- 将顶层细胞暴露于空气中模仿了体内环境。

数据：

图1 .PNEUMACULT™培养系统使用PneumaCult™-Ex在浸没培养中扩增HBECs。在ALI培养的“扩增阶段”，在上、下小室都使用PneumaCult™-Ex。在混合时，通过去除培养基并将PneumaCult™-ALI添加到基底室，气升培养物。在ALI孵化21-28天后，获得表现假上皮的分化培养物，这些培养物可以维持较长时间（>6个月）。

图2. 使用PneumaCult™-ALI 将在PneumaCult™-Ex中培养的HBECs成功分化到假复粘膜纤毛上皮早期传代（P1-3）使用PneumaCult™-ALI在第28天成功分化PneumaCult™-Ex中培养的HBECs。H&E染色显示上皮假结构纤毛出现在顶面（A）。碘酸-希夫染色显示出现杯状细胞（B）。纤毛标记乙酰（AC）微管蛋白（绿色；C）和杯状细胞标记黏蛋白5AC（绿色，D）免疫荧光染色也证明了纤毛和杯状细胞的存在。通过免疫荧光染色基底细胞标记p75NTR（绿色）和p63（红色；E、F）可观察到在Transwell中插入适当的位置的基底细胞。一个有代表性的合并图像显示顶端细胞，通过DAPI单独检测，沿上皮与基底细胞密切接触的位置（DAPI检测，p63和p75NTR共标记）（G）。

图3.在PneumaCult™-Ex Plus, PneumaCult™-Ex和Bronchial Epithelial Growth Media中扩增的HBECs的电生理特性（P4）比较在PneumaCult™-Ex Plus, PneumaCult™-Ex和Bronchial Epithelial Growth Media中扩增的HBECs培养28天后的柱状图（A）和典型的离子通道的活动典型特征（B）。IBMX和forskolin：CFTR离子通道激活剂。Genistein：CFTR的增效剂。cftrinh-172：CFTR抑制剂。UTP：Calciumactivated Chloride channels (CaCCs) 激活剂。

图4.PneumaCult™-ALI 优化的成球培养方法图

图5.PneumaCult™-ALI 中生成的3D球的形态第2天，3D球较小。到第17天3D球开始变大而且70%出现明显的腔。到第28天几乎所有的都出现了腔。

组成成分：

▪PneumaCult™-ALI 基础培养基, 450 mL（货号#05002）▪PneumaCult™-ALI 10X 添加物t, 50 mL（货号#05003）▪PneumaCult™-ALI维持添加物 (100X), 5 x 1 mL（货号#05006）