Alkaline Phosphatase Live Stain/AP碱性磷酸酶染色

admin 2024-10-16 23

Alkaline Phosphatase Live Stain/AP碱性磷酸酶染色

货号:A14353

规格:50 µL

价格:4625

产品类型:干细胞鉴定

品牌:Thermo Fisher

碱性磷酸酶活性染料是一种干细胞成像产品,用户可利用其对多能性干细胞 (PSC) 进行鉴别染色。该染料是碱性磷酸酶 (AP) 的细胞可渗透荧光底物,对细胞无毒性,两个小时后即可扩散出去。碱性磷酸酶活性染料包括50 µL的500X荧光染料 (DMSO溶解),足够完成两块24孔板、四块6 cm培养皿或两块10 cm培养皿的染色。碱性磷酸酶多能性干细胞检测方法AP是一种PSC表型标志物,包括未分化的胚胎干细胞 (ESC)、诱导多能性干细胞 (iPSC) 和胚胎生殖细胞 (EGC)。AP在大多数细胞类型中均有表达,但其在PSC内的表达水平明显升高。因此AP染色已应用于PSC的鉴别染色,采用该方法可轻松将PSC与用作饲养细胞的小鼠胚胎成纤维细胞 (MEF) 及重编程实验中常用的亲代成纤维细胞区分开来。无需牺牲宝贵的集落,即可实现多能性筛选碱性磷酸酶活性染料可维持干细胞的活性,因此适用于在重编程流程的早期筛选集落。它还可在较晚期作为阴性选择工具用于鉴别未分化的细胞。快速细胞染色碱性磷酸酶活性染料采用了简单、非永久性的细胞活性实验方案,用于您的实验中PSC的鉴别。只需用培养基稀释染料,加入细胞中,轻轻冲洗,即可用于荧光成像。

优点:

- 识别信号高于背景的多能干细胞;- 率先使用能维持细胞活性的碱性磷酸酶染料;- PSC染色一般只需20分钟甚至更短时间。

数据:

图1. 碱性磷酸酶(AP)活染显示强烈的多能干染色,而成纤维细胞背景很小BJ人成纤维细胞是一种常见的体细胞来源用于重编程。有丝分裂灭活的小鼠胚胎成纤维细胞通常用作多能干细胞培养的滋养层细胞呈现最小的AP染色背景。 在MEF滋养层上生长的小鼠ESC和人ESC显示多能干细胞集落的特异性染色。BJ人成纤维细胞经Cyto tune重编程试剂盒重编程形成的iPSC,无论是在滋养层培养条件下还是无滋养层培养条件下,AP活染都具有较强的染色能力。图2. AP染色流程

图3. AP活性染色(货号#A14353)是可逆的用AP活性染料染色H9 ESC显示对ESC集落有较强的染色能力。染料从培养基中去除90分钟后,绿色荧光信号也随之消失。

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技术参数

产品优点 1.识别信号高于背景的多能干细胞; 2.率先使用能维持细胞活性的碱性磷酸酶染料; 3.PSC染色一般只需20分钟甚至更短时间。

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