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PneumaCult™-Ex Plus Medium/支气管上皮细胞扩增培养基

2024-10-17

PneumaCult™-Ex Plus Medium/支气管上皮细胞扩增培养基

货号：05040

规格：1 Kit

价格：3380

产品类型：支气管上皮细胞培养

品牌：STEMCELL Technologies

PneumaCult™-Ex Plus是一种不依赖饲养层，不含血清及牛垂体提取物（BPE）的培养基，与其它商业培养基相比，该培养基支持每一代细胞更多的扩增；当与PneumaCult™-ALI配合使用时，PneumaCult™-Ex Plus支持更好的气液交界面细胞分化潜能，即便在延长传代代数之后，仍然能保持形态学和电生理学特征。PneumaCult™-Ex Plus彻底解决了这个问题：在扩增培养期间，研究人员可以扩增细胞至更高的代数，并且在随后的气-液界面（ALI）培养期间，保持黏膜纤毛分化的潜能（见图1）。因此，PneumaCult™-Ex Plus帮助研究人员从一个病人的微量呼吸道样本生成更多细胞从而进行更多的实验。

优点：

- PneumaCult™-Ex Plus是无血清、无BPE的批次稳定的培养基；- 与其它商业培养基相比，PneumaCult™-Ex Plus支持每一代细胞更多的扩增；-当PneumaCult™-ALI配合使用时，PneumaCult™-Ex Plus支持更好的气液交界面细胞分化潜能，即便在延长传代代数之后，仍然能保持形态学和电生理学特征。

数据：

图1 .PNEUMACULT™培养系统使用PneumaCult™-Ex Plus 或 PneumaCult™-Ex对HBECs进行浸润培养扩增。在ALI培养过程的早期“扩增阶段”，在顶室和基底室加入PneumaCult™-Ex Plus 或 PneumaCult™-Ex。当细胞数量接近满板时，去除顶室和基底室里的培养基，将新鲜的PneumaCult™-ALI只加入到基底室里，细胞顶层接触空气。21-28天后，HBECs 分化为假复层的黏膜纤毛上皮细胞，且可以维持培养一年以上。

图2. 与PneumaCult™-Ex或Bronchial Epithelial Growth Media相比，在PneumaCult™-Ex Plus里培养的HBECs扩增速率更快将市售的冷冻保存的P1 HBECs接种到PneumaCult™-Ex Plus、PneumaCult™-Ex、或Bronchial Epithelial Growth Media中。与任何一种对照培养基相比，在PneumaCult™-Ex Plus中培养的细胞经过9个传代后具有显著的更高的增殖速率（n =9）。

图3. 人体支气管上皮细胞（HBECs）的代表性形态在PneumaCult™-Ex Plus、PneumaCult™-Ex、或Bronchial Epithelial Growth Media:里培养的P4HBECs的代表性的细胞培养图像。与PneumaCult™-Ex（B）Bronchial Epithelial Growth Media（C）相比，在Pneumacult™-Ex Plus（A）里培养的细胞形态更小、排列更紧密。所有的图像均使用10倍物镜拍摄。

图4. 在PneumaCult™-Ex Plus中培养的HBECs能够保持基底细胞标记物CD49f和CD271的广泛表达在PneumaCult™-Ex Plus（A和D）、PneumaCult™-Ex（B和E）、以及Bronchial Epithelial Growth Media（C和F）里进行培养的P4 HBECs的基底细胞标记物-CD49f（A、B、C）以及CD271（D、E、F）的免疫荧光检测。所有的图像均使用10倍物镜拍摄。

图5. 在PneumaCult™-Ex Plus里培养的HBECs具有更高比例的CD271+ CD49f+细胞对在PneumaCult™-Ex Plus（A）、PneumaCult™-Ex（B）、以及Bronchial Epithelial Growth Media:（C）里进行培养的P4 HBECs进行流式检测，检测具有基底细胞标记物CD49f和CD271的表达水平。与PneumaCult™-Ex（B）和Bronchial Epithelial GrowthMedia（C）相比，在PneumaCult™-Ex Plus（A）培养的HBECs具有更高比例的CD49f和CD271双阳性表达。

图6. 在PneumaCult™ - Ex Plus中培养的HBECs在传代后期使用Pneumacult™- ALI分化为假复层黏膜纤毛上皮细胞将P4 HBECs进行接种入PneumaCult™-Ex Plus、PneumaCult™-Ex、或Bronchial Epithelial Growth Media进行传代，然后使用Pneumacult™-ALI，在每代（P5至P8）进行ALI分化。接触空气后的28天，进行纤毛标记物AC-微管蛋白（红色）和杯状细胞标记物Muc5AC（绿色）的抗体染色。细胞核使用DAPI（蓝色）进行标记。所有的图像均使用20倍物镜拍摄

图7. 在PneumaCult™-Ex Plus、PneumaCult™-Ex、以及支气管上皮细胞生长培养基中扩增的HBECs（P4）分化后的电生理学表征在PneumaCult™-Ex Plus、PneumaCult™-Ex或Bronchial Epithelial Growth Media中扩增的HBECs，接触空气28天的ALI培养，检测TEER（A）和代表离子通道活性（B）。Amiloride：上皮钠通道（ENaC）抑制剂。IBMX 和 Forskolin：囊性纤维化跨膜转导调节因子（CFTR）活化素。Genistein：CFTR增效剂。CFTRinh-172：CFTR抑制剂。UTP：钙离子激活的氯离子通道（CaCCs）。所有的ALI分化培养都使用PneumaCult™-ALI。

组成成分：

▪PneumaCult™-Ex Plus Basal Medium, 490 mL▪PneumaCult™-Ex Plus 50X Supplement, 10 mL

PneumaCult™-Ex Plus Medium/支气管上皮细胞扩增培养基

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