Subcellular Protein Fractionation Kit for Tissues / 组织的亚细胞蛋白分离试剂盒

2024-10-17

Subcellular Protein Fractionation Kit for Tissues / 组织的亚细胞蛋白分离试剂盒

货号:87790

规格:115 mL

价格:5985

产品类型:蛋白提取/纯化

品牌:Thermo Fisher

用于组织的 Thermo Scientific 亚细胞蛋白分离试剂盒包括在 2 小时内对 5 种不同细胞区室中的蛋白进行细胞分离和富集所需的所有试剂和组织过滤器。用于组织的亚细胞蛋白分离试剂盒的特点:•优化—针对组织分离的特定配方和方案•全套—使用单一试剂盒获得细胞质、膜、可溶性核、染色质结合和细胞骨架蛋白组分•时间高效—在约 2 小时内无需超速离心即可提取功能蛋白组分•便利—独特的组织过滤器可快速去除组织碎片•兼容—使用用于下游应用(如 Western 印迹蛋白检测、蛋白免疫印迹分析、电泳迁移率变动实验、报告基因和酶活性测定)的提取物。•通用—从各种组织类型(包括肝脏、心脏、脑、肾、肺和脾脏)中提取蛋白应用:• 从相同组织样品中获得细胞质、可溶性核、染色质结合、膜和细胞骨架蛋白• 针对细胞质、核、膜和细胞骨架中的蛋白,扼要描述疾病状态与正常组织• 研究组织中蛋白转位用于组织的亚细胞蛋白分离试剂盒包括一个独特 250 µM 组织过滤器以促进均质化后组织碎片中细胞混悬液的快速分离。优化的试剂可对细胞质、膜、可溶性核、染色质结合和细胞骨架蛋白进行后续逐步提取,使其交叉污染小于 15%。用于组织的亚细胞蛋白分离试剂盒包含四种提取缓冲液、组织过滤器、稳定的核酸酶和 Thermo Scientific Halt 蛋白酶抑制剂混合物。每个试剂盒都有足够的试剂和组织过滤器以处理和分离 25 份组织样品(各多达 200 mg)。在第一种试剂中将组织均质化,产生选择性膜透化作用,释放可溶性的细胞质内容物。将匀浆转移至组织过滤器中以去除多余的组织碎片。第二种试剂可溶解细胞质、线粒体和 ER-高尔基体膜,但不能溶解核膜。在通过离心回收完整的细胞核后,第三种试剂产出可溶的细胞核提取物。使用微球菌核酸酶进行一次额外的细胞核提取,以释放染色质连结细胞核蛋白。然后,用最终试剂提取回收的不溶性沉淀以分离细胞骨架蛋白。
特点:
-优化—针对组织分离的特定配方和方案-全套—使用单一试剂盒获得细胞质、膜、可溶性核、染色质结合和细胞骨架蛋白组分-时间高效—在约 2 小时内无需超速离心即可提取功能蛋白组分-便利—独特的组织过滤器可快速去除组织碎片-兼容—使用用于下游应用(如 Western 印迹蛋白检测、蛋白免疫印迹分析、电泳迁移率变动实验、报告基因和酶活性测定)的提取物。-通用—从各种组织类型(包括肝脏、心脏、脑、肾、肺和脾脏)中提取蛋白
应用:
- 从相同组织样品中获得细胞质、可溶性核、染色质结合、膜和细胞骨架蛋白- 针对细胞质、核、膜和细胞骨架中的蛋白,扼要描述疾病状态与正常组织- 研究组织中蛋白转位
数据:
Schematic of the subcellular fractionation protocolProteins are sequentially extracted using differential detergents. CEB = cytoplasmic extraction buffer; MEB = membrane extraction buffer; NEB = nuclear extraction buffer; NEB + MNase = nuclear extraction buffer plus micrococcal nuclease (chromatin-bound fraction); PEB = pellet extraction buffer.

Mouse tissue samples effectively fractionated using the Subcellular Protein Fractionation Kit for TissuesNormalized loads of each extract (10µg) were analyzed by Western blotting. CE = cytoplasmic extract; ME = membrane extract; NE = nuclear extract; CB = chromatin-bound extract; PE = pellet extract.

技术参数
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