MyoCult™ Expansion 10X Supplement (Mouse)/MyoCult 10X扩增添加物(小鼠)

admin 2024-10-17 13

MyoCult™ Expansion 10X Supplement (Mouse)/MyoCult 10X扩增添加物(小鼠)

货号:05985

规格:10 mL

价格:1416

产品类型:肌源性干细胞培养

品牌:STEMCELL Technologies

MyoCultTM10X扩增添加物(小鼠)与DMEM/F-12配合使用制备肌细胞扩增培养基,用于培养小鼠骨骼肌祖细胞(卫星细胞)。MyoCult 扩增培养基优化用于扩增通过流式分选的小鼠骨骼肌卫星细胞和单个分离的肌成纤维细胞悬浮培养。利用MyoCult培养基培养培养的卫星细胞可以分化为多核肌管。为了制备MyoCultTM扩增培养基,除了MyoCultTM10X扩增添加物外,还需要DMEM/F-12和15mm HEPES(货号#36254)。为了扩增卫星细胞,培养器皿必须包被基质,如Corning Matrigel(Corning,货号#356234)。

优点:

- 高效。与自配培养基相比在小鼠卫星细胞扩增中表现更优越;- 一致。严格的原材料筛选和质量控制,降低批次间不稳定性;- 灵活。与小鼠卫星细胞扩增培养基兼容,可用于分离的肌纤维细胞的悬浮培养。

数据:

图1 在MyoCultTM扩增培养基中培养的流式分离的PAX7+小鼠卫星细胞比在自制培养基中更有效流式分离的CD45-/CD31-/SCA1-、ALPH7-整联蛋白+/VCAM1+卫星细胞以2000个细胞/孔(24孔板)接种在24孔板中,并使用完全的MyoCultTM扩增培养基(小鼠)或常用的自制培养基进行培养扩增。培养6天后,(A)对卫星细胞进行细胞核(DAPI、蓝色)和PAX7(红色)免疫染色。此外,(B)PAX7+卫星细胞的总数和(C)百分比被量化(n=3)。误差线表示平均值(SEM)的标准误。自制培养基是由不列颠哥伦比亚大学法奥·罗西博士的实验室提供的。

图2 流式分离的小鼠卫星细胞MyoCultTM扩增培养基中培养多代流式分离的CD45-/CD31-/SCA1-、ALPH7-整联蛋白+/VCAM1+卫星细胞,以2000个细胞/孔(24孔板)接种在24孔板中,使用完整的MyoCultTM扩增培养基(小鼠)或常用的自制培养基培养。在12天后(2次传代),使用相差显微镜对(A)卫星细胞进行成像,并且(B)定量MyoD+卫星细胞(n=3)。误差线表示平均值(SEM)的标准误。自制培养基是由不列颠哥伦比亚大学法奥·罗西博士的实验室提供的。

图3 在Myocult™扩增培养基中扩增的小鼠卫星细胞维持分化能力流式分离的CD 45-/CD 31-/Sca 1-,α7-整合素/Vcam1卫星细胞用完全MyoCult™扩增培养基(小鼠)或常用的自制培养基培养2代(分离后12天),然后用分化培养基(含2%马血清的高糖DMEM)处理。分化4d后,(A)在MyoCult™扩增培养基中进行细胞核(DAPI,蓝色)和肌球蛋白重链(Myhc,红色)的免疫组化染色,(B)定量细胞核和MyHC共定位的肌管细胞(融合指数)(n=3)。误差线表示平均值(SEM)的标准误。自制培养基是由不列颠哥伦比亚大学法奥·罗西博士的实验室提供的。

图4单个分离的小鼠肌成纤维细胞在Myocult™扩增培养基中培养无需添加其它添加物单个离体肌纤维可以用完全的Myocult™扩增培养基或自制的肌纤维培养基悬浮培养。4天后,免疫染色(A)检测完整的、有活力的肌纤维(n=3)和(B)Pax7(红色)。误差线表示电镜扫描。肌纤维自制培养基由不列颠哥伦比亚省大学Fabio Rossi博士的实验室提供。当使用MyoCult™扩增培养基时,肌纤维培养不需要特定的肌纤维培养基(或添加物)。

相关产品:

▪DMEM/F-12 with 15 mM HEPES(货号#36254)▪Corning Matrigel(Corning,货号#356234)

技术参数

产品应用 细胞培养; 扩增

产品类型 专业培养基

细胞类型 肌源性干细胞和祖细胞

产品线 MyoCult

适用物种 小鼠

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