NHS-荧光素（5/6-羧基荧光素琥珀酰亚胺酯），混合异构体
货号：46410,46409
规格：100 mg,1 g
价格：1659,10626
产品类型：蛋白标记
品牌：Thermo Fisher
| NHS-荧光素是一种荧光素染料的胺反应性衍生物，具有广泛的分析应用，可作为抗体和其他探针的标记，用于荧光显微镜检查、流式细胞术和免疫荧光测定（如 Western 印迹和 ELISA）。NHS-酯或异硫氰酸盐在伯胺（赖氨酸侧链）处有效标记抗体和其他纯化蛋白。NHS-荧光素通过N-羟基-琥珀酰亚胺-酯（NHS 酯）官能团活化。与 FITC 相比，NHS-酯衍生物在存在其他亲核试剂的情况下对伯胺具有更高的特异性，并在标记后产生更稳定的键。Pierce 胺反应性荧光素染料是具有与底部环的 5- 和 6-位置连接的反应性基团的异构体混合物。这些异构体的特性在激发和发射光谱方面无法区分，对于蛋白应用，不需要分离特定异构体。 |
| 特性 |
| •别名：5/6-FAM SE• 化学名称：5/6-羧基荧光素琥珀酰亚胺酯• 分子量：473.4• 激发源：488 nm 光谱线，氩离子激光• 激发波长：494 nm• 发射波长：518 nm• 消光系数：> 70,000 M-1cm-1• CAS #：117548-22-8• 纯度：> 90%（HPLC 法）• 溶解度：可溶于 DMF 或 DMSO• 反应性基团：NHS 酯与伯胺在 pH 值 7.0 至 9.0 下反应 |
| 应用 |
| • 标记抗体用作免疫荧光探针• 标记寡核苷酸用作杂交探针• 检测凝胶和 Western 印迹中的蛋白 |
| 数据 |
Detection of α-tubulin in A549 cells demonstrates use of fluorescein-labeled secondary antibodyCells were grown in 96-well microplates for 18-20 hrs, fixed with 4% paraformaldehyde (Part No. 28906) and permeabilized with 0.1% Surfact-Amps X-100 (Part No. 28314). Cells were then probed with a mouse anti-α-tubulin primary antibody (0.4µg/mL) and Fluorescein-goat anti-mouse secondary antibody (2µg/mL). Nuclei were labeled with Hoechst Dye. Images were acquired by fluorescence microscopy.A.Fluorescence image shows a delicate network of α-tubulin (pseudo-colored green) located exclusively in the cytoplasm.B.Nuclear counterstain with Hoechst Dye (pseudo-colored blue)C.Merged image. Comparison of NHS-Fluorescein and FITC Chemical structures of FITC and NHS-FluoresceinBoth of these compounds allow fluorescent labeling of primary amines on proteins and other molecules. |
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