STEMdiff™ Mesoderm Induction Medium/STEMdiff™中胚层诱导培养基
货号：05220
规格：100mL
价格：1400
产品类型：多能干细胞培养
品牌：STEMCELL Technologies
| STEMdiff™中胚层诱导培养基（MIM）是一款成份确定、无异种动物源成分的培养基，用于从人胚胎干细胞（ES）和诱导性多能干细胞（iPS）产生早期中胚层细胞。中胚层分化的流程可能比较困难而且一致性较差，因此，使用短而简单的STEMdiff™MIM单层分化流程进行人类多能干细胞（hPSC）的分化。STEMdiff TM MIM是产生富含早期中胚层细胞群（通过Brachyury（T）和NCAM标记的阳性表达指示）的完全培养基。作为hPSC工作流程的一部分，STEMdiff™MIM可以有效分化在TeSR™培养基中培养的hPSCs。使用STEMdiff™MIM产生的早期中胚层细胞可以进一步分化为特异的细胞类型，如成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞或内皮细胞。有关更多信息，请参阅下面的数据。 |
| 优点： |
| - 成分确定和无异种成分； - 在2 - 4天内迅速诱导中胚层； - 多种人ES和iPS细胞系的高效和可重复的分化； - 产生能够下游分化成多种下游细胞类型的早期中胚层细胞。 |
| 数据： |
图1.中胚层诱导培养基分化时间轴在第0天，收获hPSC集落并以5×104 / cm2接种在添加了终浓度为10μMY-27632的mTeSR™1或TeSR™-E8™中。当细胞在大约20-50％汇合时，用STEMdiff™中胚层诱导培养基在第1天替换TeSR™培养基。 然后每天喂养细胞并在STEMdiff™MIM中培养（第2-4天）。 细胞可以在3-5天进行分化实验或者再底天收集细胞进行分析。图2. STEMdiff™MIM产生T + OCT4-的同质群早期中胚层（A）在流程的第5天显示早期中胚层（Brachyury（T）阳性和OCT4和SOX17阴性）。 数据表示的是表达每个标记的细胞的平均百分比±SD，n = 33（T，OCT4），n = 5（SOX17）。 （B）通过定量PCR（qPCR）测量未分化细胞标志物（OCT4，SOX2，NANOG）和早期中胚层标志物（T，MIXL1，NCAM）的表达并归一化至未分化细胞中的水平，n = 2。图3.多个hPSC细胞系的中胚层分化和细胞扩增的有效性和比较柱图显示多个人ES（H1和H9）和iPS（WLS-4D1，WLS-1C，STiPS-M001和STiPS-F016）细胞系的中胚层形成，通过Brachyury（T）的表达和OCT4的缺失表达测量。（A）mTeSR TM 1或（B）TeSR TM -E8 TM培养基中维持的细胞使用STEMdiff™MIM分化。（A，每个细胞系n = 2-10，B，n = 3，数据表示为平均百分比±SD）（C）Corning®Matrigel®或Vitronectin XF™上的中胚层分化的比较。（n = 5，数据是平均百分比±SD）（D）通过细胞产量/接种细胞在STEMdiff™MIM中培养的细胞的平均增加倍数。 （n = 3-13。误差线表示SEM）图4.用STEMdiff™MIM处理的细胞表型与早期中胚层一致（A）在mTeSR™1中培养的hPSC的EpCAM + NCAM - /low到（B）STEMdiff™ MIM-处理的细胞STEMdiff™ MIM-处理的细胞的EpCAM- /低NCAM +表达的代表性流式细胞术图（第5天）。 EpCAM - /lowNCAM +表达是早期中胚层的特征。（C）在mTeSR TM 1中培养的hPSC和（D）用STEMdiff™ MIM衍生的早期中胚层细胞都地表达PDGFRα和KDR。图5.源自早期中胚层细胞的间充质干细胞可以在体外检测中进一步分化（A）使用STEMdiff™ MIM操作方案在第5天产生的早期中胚层细胞，用MesenCult™ -ACF培养，产生间充质干细胞（MSC）样形态，放大40倍。 MSC样细胞随后可以分化成（B）脂肪细胞（油红O染色），放大200倍，（C）软骨细胞（阿尔新蓝染色），放大100倍和（D）成骨细胞（快速红和硝酸银染色）， 放大40倍。图6. STEMdiff™ MIM产生的早期中胚层细胞的强烈内皮分化在STEMdiff™ MIM操作方案的第3天，基于Tan等人的下游内皮分化方案早期中胚层细胞被转化为内皮细胞分化。（A）分化的细胞显示内皮细胞形态特征，并且（B）能摄取Dil-Ac-LDL（红色）。图为代表性流式图（C）分化的内皮中85.5％表达CD144 + CD31 +和（D）87.6％表达CD105 + KDR +。 |
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技术参数 产品优点 1.成分确定和无异种成分；
2.在2 - 4天内迅速诱导中胚层分化；
3.多种人ES和iPS细胞系的高效和可重复的分化。
产品应用 分化; 细胞培养
产品类型 专业培养基
细胞类型 多能干细胞; PSC衍生中胚层
产品线 STEMdiff
适用物种 人
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