STEMdiff™ Cerebral Organoid Kit/STEMdiff™ 脑类器官成熟试剂盒
货号：08571
规格：1 kit
价格：1486
产品类型：类器官培养
品牌：STEMCELL Technologies
| STEMdiff™ 脑类器官试剂盒是成份明确、不含血清的细胞培养基，设计用于将人PSC通过简单的四阶段分化成脑类器官。hPSC衍生的脑类器官是一种具有典型的发育中人脑的细胞成份和结构组织的三维（3D）体外培养模型。STEMdiff™ 脑类器官试剂盒基于MA Lancaster 和JA Knoblich8 发表的配方研发，并进行了优化从而提升了类器官的形成效率和重复性。培养40天后，这些脑类器官具有层 次分明的祖细胞群，并产生成熟神经元，与在早期发育中人脑皮质层的观察结果相符。脑类器官形成首先通过形成拟胚体(EB)，接着扩增神经上皮。经过一段时间成熟后，使用该试剂盒产生的器官具有了与体内观察到的相同的皮质样区域特征层，如心室区(Pax6/SOX2/Ki-67)、外部亚心室区(Ki-67/P-Vimentin)、中间区(TBr2)和皮质板(CTTiP2/MAP2/TBr1)。对于器官脑类器官的延长培养（>40天），可使用STEMdiff™ 脑类器官成熟试剂盒(货号 #08571)。 |
优点： |
| - 生理相关。三维体外系统可重现脑发育过程和发育中的脑结构。- 创新。基于无血清人多能干细胞的模型可实现对脑发育和疾病过程的研究。 - 优化。为了提升类器官的形成效率，对配方进行了优化。 - 可靠。严格的原材料筛选和广泛的质控测试确保了高度的重复性和最小的批次间差异性。 - 简单。试剂盒成分简单，操作方便。 |
数据： |
| 图1. STEMdiff™脑类器官试剂盒的示意图将在mTeSR1™中维持培养的人多能干细胞（胚胎干细胞或诱导多能干细胞）使用温和细胞解离试剂（GCDR）解为单细胞悬液，以密度为9000细胞/孔接种至U-Bottom 96孔超低粘附培养板（Corning®）中，接种培养基为EB形成培养基 + 10 µMY-27632。每隔2天更换为不含Y-27632的EB形成培养基。5天之后，将EBs转移到含有诱导培养基的24孔超低粘附培养板中。对EB培养2天后，使用液体Matrigel®（减少生长因子，Corning®）包被EBs。接下来将它们转移到经过无组织培养处理的6孔板（12-16类器官/孔）中。嵌入的类器官在扩张培养基中维持培养3天。在第10天时，将类器官转换到成熟培养基中，然后放置在RPM为57-95的定轨摇床（Infors HT）上对其进行培养。在成熟培养基中，每3-4天进行换液。在第40天时，类器官进行RT-qPCR分析或冰冻切片后进行免疫染色。EBs形成、诱导和类器官扩张的比例尺 = 300 µm。类器官成熟的比例尺 = 1 mm。图2. 对使用STEMdiff™脑类器官试剂盒生成的脑类器官进行鉴定（A）使用STEMdiff™脑类器官试剂盒生成的整个脑类器官（第40天）于相差显微镜下的代表性图像。这一时期的脑类器官具有暗相衬结构，且该结构周围可能是更薄更透明的、显示分层的区域（箭头所示）（B）在对脑类器官冰冻切片进行免疫组化分析时，通过顶端祖细胞标志物PAX6（红色）和神经元标志物III类β-微管蛋白（TUJ-1）（绿色），显示出类器官内部的皮质区域。（C-F）对（B）划线区域的放大图像。（C）PAX6+顶端祖细胞（红色，虚线之内）位于脑室带样区域。III类β-微管蛋白+神经元（绿色）位于该脑室带附近。（D）CTIP2（即发育中皮质板的标志物）与III类β-微管蛋白+神经元共同位于皮质板样区域。各层结构重现了在人脑发育中观察到的早期脑皮质发育。（E）被Ki-67（绿色）标记的增殖祖细胞沿脑室带分布，细胞核被DAPI复染（蓝色）。（F）在外脑室下区状区域中发现了额外的Ki-67+细胞群（箭头所示）。比例尺：（A）1 mm、（B）500 μm、（C-F）200 μm。图3.使用STEMdiff™脑类器官试剂盒生成的类器官与文献描述的类器官相似对hPSC和脑类器官进行转录组学分析。使用STEMdiff™脑类器官试剂盒生成的脑类器官（蓝色实心圆）彼此聚集在一起，同时也与先前公布的脑类器官（蓝色空心圆）相互聚集。第一主成分是造成绝大多数差异（PC1；80%）的原因，并且用来区分脑类器官样本与hPSC（绿色圆）。第二主成分是造成细微差异（9%）的原因，并且突出了已培养的类器官与原代胚胎脑样本（胎龄为19周；棕色圆）之间在基因表达上仅有细微差异。 |
组成成分： |
| ▪STEMdiff™ 脑类器官基础培养基2, 250 mL▪STEMdiff™ 脑类器官添加物 E, 4.5 mL |
相关产品： |
| ▪mTeSR™1（货号#85850）▪BrainPhys™ 神经元培养基（货号#05790）▪STEMdiff™神经诱导培养基（货号#05835）▪STEMdiff™神经元分化培养基（货号#08500）▪STEMdiff™ 脑类器官试剂盒 |
技术参数 产品优点 1.生理相关。三维体外系统可重现脑发育过程和发育中的脑结构。
2.创新。基于无血清人多能干细胞的模型可实现对脑发育和疾病过程的研究。
3.优化。为了提升类器官的形成效率，对配方进行了优化。
产品应用 细胞培养; 分化; 类器官培养
产品类型 类器官培养基
细胞类型 PSC衍生神经细胞; 神经干细胞和祖细胞; 多能干细胞
产品线 STEMdiff
适用物种 人
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