T-PER Tissue Protein Extraction Reagent / T-PER组织蛋白提取试剂
货号：78510
规格：500 mL
价格：4513
产品类型：蛋白提取/纯化
品牌：Thermo Fisher
| 该试剂利用专利的去垢剂裂解组织内的细胞，其缓冲体系为25mM N-二(羟乙基) 甘氨酸和150mM 氯化钠(pH 7.6)，通过均化作用实现哺乳动物组织样本中最大的蛋白溶解效率。由于该试剂配方简单所以其应用广泛，可以根据不同的应用要求在进行细胞裂解之前向其中加入蛋白酶抑制剂、盐、还原剂、螯合剂等。利用该试剂制备的裂解物可直接用于报告基因实验分析（例如荧光素酶、β- 半乳糖苷酶、氯霉素乙酰基转移酶）、蛋白激酶分析( 例如PKA、PKC、酪氨酸激酶)、免疫分析（例如蛋白免疫印迹、ELISA、RIA）以及蛋白纯化实验等下游分析。因为组织成分和抽提方法不同，从不同样品中均匀有效地抽提组织蛋白有一定的难度。纤维化和胶原性组织（如心脏和肾脏）可以不用加入去垢剂，而通过冻融、研钵及研杵研磨方法进行抽提。相反，软组织（如脾和肝）则需要温和方法才能获得良好结果。T-PER适用于所有组织的抽提，取代机械抽提方法。作用温和的去垢剂可提高蛋白的溶解而不损伤蛋白的功能，该试剂的中性pH和盐浓度可以更有效从细胞中抽提蛋白，从而产生均一的裂解物。按照冷冻组织和冻融组织抽提步骤，使用T-PER试剂对新鲜和冷冻组织中抽提到的蛋白产量进行验证，证明使用T-PER试剂可以获得更高的蛋白产量。而且T-PER试剂被证明可以有效的从不同的细胞器中抽提靶蛋白，如浆膜（Na-K+ ATP酶、钙粘素）、细胞浆(HSP90、MAPK)、线粒体(COXIV),和作为脑组织（突触素）及心脏组织（肌钙蛋白T心脏同种蛋白）特异性标志物的细胞核(HDAC1)。 |
| 特点： |
| • 步骤简单— 仅需按照1:20(w/v)将组织样品与T-PER抽提试剂混合，匀浆组织样品，然后离心沉淀细胞或组织碎片• 温和、方便— 可以通过透析快速方便的去除去垢剂；可以与其他成分一起使用( 例如蛋白酶抑制剂、盐、还原剂、螯合剂等)• 灵活— 裂解物可用于报告基因分析、蛋白激酶分析、免疫分析和/或蛋白纯化• 兼容性强— 裂解物与Pierce考马斯增强型(Bradford)等标准蛋白定量分析试剂兼容 |
| 数据： |
| Tissue cell lysis protein yield with T-PER Tissue Protein Extraction ReagentDuplicate tissue samples were weighed, resuspended in 1:10 to 1:20 w/v T-PER Reagent and disrupted in a chilled Dounce or benchtop tissue homogenizer. The resulting lysates were centrifuged at 10,000xg for 5 minutes and the supernatant was collected. The protein concentration of each lysate was determined using the Pierce BCA Protein Assay (Part No. 23227) to determine protein yield per milligram of starting tissue. Protein extraction from cellular compartments using T-PER Tissue Protein Extraction Reagent.Lysates from prepared using T-PER Reagent and extraction efficiency from the various cellular compartments of different tissues compared. For each target protein, 10µg of lysate was loaded for and electrophoresed by SDS PAGE, transferred to nitrocellulose membrane and detected by Western blot using SuperSignal West Pico Chemiluminescent Substrate (Part No. 34080). |
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