Alexa Fluor 680 NHS 酯（琥珀酰亚胺酯）

货号：A20008,A37574,A20108,A37567

规格：1 mg,3 x 100 µg,5 mg,25 mg

价格：5990,3357,23626,64685

产品类型：蛋白标记

品牌：Thermo Fisher

Alexa Fluor 680 是一种明亮的光稳定性近红外染料，与 Cy5.5 染料光谱相似。Alexa Fluor 680 染料用于成像和流式细胞分析中的稳定信号生成，具有水溶性和 pH 值不敏感性（pH 值 4 - pH 值 10）。该长波长 Alexa Fluor染料的荧光人眼不可见，但很容易被大多数成像系统检测到。除活性染料制剂外，我们还提供可与多种抗体、肽、蛋白、示踪剂和扩增底物偶联的 Alexa Fluor680 染料，以优化细胞标记和检测。Alexa Fluor 680 的 NHS 酯（或琥珀酰亚胺酯）是将该染料与蛋白或抗体偶联的较常用工具。NHS 酯可用于标记蛋白、胺修饰的寡核苷酸和其他含胺分子的伯胺 (R-NH2)。所得 Alexa Fluor 偶联物将显示出比其他光谱相似荧光基团的偶联物更亮的荧光和更高的光稳定性。典型偶联反应您可以将胺反应性试剂与几乎任何蛋白或肽偶联（提供的方案针对 IgG 抗体进行了优化）。您可以针对任何量的蛋白进行反应，但为了获得较佳结果，蛋白的浓度应至少为 2 mg/mL。我们建议使用三种不同摩尔比的反应性试剂对蛋白进行三种不同程度的标记。Alexa Fluor NHS 酯通常溶于高质量的无水二甲基甲酰胺 (DMF) 或二甲亚砜 (DMSO) (D12345) 中，并在 0.1 – 0.2 M 碳酸氢钠缓冲液（pH 值 8.3）中于室温下进行反应，持续 1 小时。由于末端胺的 pKa 低于赖氨酸 ε -氨基基团的 pKa，您可以使用接近中性 pH 值的缓冲液对胺末端进行更具选择性的标记。偶联物纯化通常使用凝胶过滤柱（如 Sephadex G-25、BioGel P-30或等同柱）将标记抗体与游离 Alexa Fluor 染料分离。对于更大或更小的蛋白，选择具有适当分子量滤除点的凝胶过滤介质或通过透析纯化。我们提供了几种优化的纯化试剂盒，用于不同量抗体偶联物：0.5-1 mg 用抗体偶联物纯化试剂盒 (A33086)20-50µg 用抗体偶联物纯化试剂盒 (A33087)50-100µg 用抗体偶联物纯化试剂盒 (A33088)

技术参数

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