Click-iT HPG Alexa Fluor 594蛋白合成检测试剂盒
货号:C10429
规格:1 kit
价格:9665
产品类型:蛋白标记
品牌:Thermo Fisher
Click-iT HPG Alexa Fluor 594蛋白合成检测试剂盒提供了一种快速、灵敏、无毒的非放射性方法,采用荧光显微镜、高含量成像或流式细胞术检测新生蛋白合成。试剂盒中包含L-同炔丙基甘氨酸(HPG,蛋氨酸的氨基酸类似物,含有炔基)和 Alexa Fluor 594叠氮化物。用 HPG 饲喂培养细胞,在活性蛋白合成过程中掺入蛋白中。添加 Alexa Fluor 594 叠氮化物会导致绿色荧光叠氮化物和炔烃之间的化学选择性连接或“点击反应,从而通过基于成像的分析检测修饰蛋白。Click-iT HPG Alexa Fluor 594 蛋白合成检测试剂盒已在 HeLa、A549 和 U-2 OS 细胞中使用多种抑制蛋白合成的试剂(包括放线菌酮和茴香霉素)成功进行了检测。HeLa 细胞中蛋白酶体抑制剂(MG132和 硼替佐米)和自噬阻滞剂(氯喹)的应用也体现了这些探针监测蛋白降解的适用性。此外,由于 Click-iT HPG Alexa Fluor 594 蛋白合成检测试剂盒和Click-iT AHA Alexa Fluor 488 HCS 试剂盒之间的 Click-iT 化学差异,这些试剂盒可联合用于新生蛋白合成差异的空间或时间测定。 |
特点 |
•无放射性替代—传统35S-蛋氨酸的替代品•可视化大分子蛋白动态{66蛋白的荧光标记可以确定它们的定位,包括聚集情况•特异性—标记和检测标签之间选择性、特异性反应•稳定性—产物包含一个不可逆共价键•多重使用—与 Click-iT AHA(叠氮化物氨基酸和炔烃染料)共同使用以检测空间和时间差异•适用于生物样品—易检测、高灵敏度和低背景(无论复杂性如何) |
数据 |
Click-iT HPG kits are used to detect newly synthesized proteins.Inhibition of the protein decreases the Click-iT HPG signal in U2- OS cells. The graph above quantifies minimum and maximum for both color variants (the Alexa Fluor® 488 and Alexa Fluor 594kits); also shown are the images for vehicle and compound. Detection of protein synthesis using the Click-iT HPG Alexa Fluor 594 Protein Synthesis Kit.U2-OS cells were cultured in the presence of 50uM HPG for one hour followed by 50um ManNaz for 24 hours. Cells were then fixed and permeabilized. HPG was detected using the Click-iT HPG Alexa Fluor 594 Kit. ManNaz was detected using an Alkyne modified Alexa Fluor 488 dye. |
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